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Ítem Colección de semen mediante electroeyaculación de vicuñas mantenidas en cautiverio(Asociación Peruana de Reproducción Animal, 2011-07-31) Pacheco Curie, Joel I.; Mamani Cato, Rubén Herberht; Deza, H. W.La vicuña es un camélido silvestre cuya población se viene recuperando de la condición de especie en extinción, y que ha sido muy poco estudiada, sobre todo en el aspecto de reproducción, colección y evaluación de semen (Enciso, 2009). La electroeyaculación es una técnica que permite obtener semen mediante la estimulación eléctrica de los centros nerviosos que controlan la eyaculación y que se utiliza en especies silvestres, habiéndose realizado con éxito en llamas (Director et al., 2007). Recientes investigaciones realizadas en obtención de semen de vicuña demuestran bajas características seminales en comparación con otros camélidos (Giuliano et al., 2002; Enciso, 2009). Los objetivos del presente trabajo fueron: determinar el volumen, color aspecto, concentración, vitalidad, motilidad, endosmosis, anormalidades y compactación cromatínica en semen obtenido por electroeyaculación.Ítem Cooling of alpaca spermatozoa using an extender with the addition of different percentages of seminal plasma(Elsevier, 2023-12-06) Bertuzzi, Mariana Lucía; Torres Mamani, Edita Yola; Pérez Durand, Manuel Guido; Huanca Mamani, Teodosio; Giuliano, Susana María; Carretero, María IgnaciaThe objective of this study was to evaluate the effect of the addition of different percentages of seminal plasma (SP) during the cooling at 5 °C of alpaca spermatozoa from vas deferens. Fifteen pools of sperm from vas deferens were evaluated and then divided into four aliquots that were diluted to a final concentration of 30 × 106 sperm/ml with either: (1) Tris with 20% egg yolk (T-EY) (control, 0% SP), (2) T-EY with 10% SP, (3) T-EY with 25% SP, and (4) T-EY with 50% SP. Samples were cooled at 5 °C and the following sperm parameters were evaluated after 24 and 48 h of storage: motility, viability, membrane function, acrosome integrity, morphology, and chromatin condensation. Motility was also evaluated after 72 h of storage. A significant decrease in progressive and total sperm motility was observed in samples cooled with 50% SP with respect to all diluted samples, while these parameters were preserved in samples cooled with 0%, 10%, and 25% SP. The percentages of sperm viability, normal morphology, and highly condensed chromatin did not change after the cooling process and were similar between cooled samples. Although a significant decrease was observed in the percentage of spermatozoa with functional membranes and with an intact acrosome in all refrigerated samples compared to raw sperm, the greatest decrease was observed in samples cooled with 50% SP. No advantage was observed from the addition of SP to alpaca spermatozoa obtained from vas deferens and being cooled. In addition, to preserve the sperm motility of cooled samples for up to 72 h, it should be recommended to include a 10% SP in the extender.Ítem Efecto de fracciones del plasma seminal, según su peso molecular, sobre la inducción de la ovulación en llamas (Lama glama)(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Facultad de Medicina Veterinaria, 2008-07-15) Vásquez E., Martha; Huanca L., Wilfredo; Huanca Mamani, Teodosio; Ratto F., Marcelo; Adams, Gregg PatrickEl presente estudio fue realizado con el propósito de evaluar el efecto de varias fracciones de plasma seminal de llamas, según su peso molecular (PM), sobre la inducción de la ovulación. Se utilizó 54 llamas hembras sin cría y en óptimo estado reproductivo, con folículo dominante >7 mm de diámetro determinado por ecografía transrectal por tres días consecutivos. Los animales se distribuyeron al azar a uno de los seis tratamientos: A) fracción de plasma seminal con PM >30 kDa, B) fracción de plasma seminal con PM entre 10 y 30 kDa, C) fracción de plasma seminal con PM entre 5 y 10 kDa, D) fracción de plasma seminal con PM <5 kDa, E) plasma seminal completo, y F) PBS. Los animales fueron tratados con una solución de 1.5 ml de la fracción de plasma seminal o placebo correspondiente por vía intramuscular. Las llamas fueron evaluadas por ecografía en el día 2 y 9 post-tratamiento para determinar la tasa de ovulación y el tamaño del cuerpo lúteo. Los resultados indicaron una tasa de ovulación del 100% en los grupos A y E, 11.1% en B y 0% en los demás tratamientos. No se encontró diferencias estadísticas entre grupos respecto al diámetro luteal. Los resultados obtenidos permiten señalar que la fracción de plasma seminal con peso molecular mayor a 30 kDa induce la ovulación en llamas.Ítem Efecto de la aplicación intramuscular de plasma seminal sobre la supervivencia embrionaria en alpacas post monta(Universidad Nacional Micaela Bastidas de Apurímac (UNAMBA), 2014-10-24) Turín, J. E.; Huanca, W.; Huanca Mamani, Teodosio; Sapana Valdivia, RómuloEl estudio se realizó entre enero y marzo de 2013, en la estación de investigación Quimsachata - Puno. Se seleccionaron hembras alpacas no gestantes (n = 105), de acuerdo a la presencia de un folículo dominante ≥ 7mm detectado por ultrasonografía transrectal y se asignaron aleatoriamente en uno de 3 grupos: G1 (n = 35) 1 ml de plasma seminal; G2 (n = 35) 1 ml de análogo de GnRH (0,0042 mg de buserelina) y G3 (n = 35) Control y apareamiento con macho de comproAlpacas fueron antes del apareamiento natural y luego fueron de comparación: Posteriormente fueron evaluadas mediante ultrasonografía transrectal el día 25 post-parto para determinar la preñez y el día 62 para determinar la tasa de supervivencia del embrión. Los resultados mostraron un 77,1%, 57,1% y 60% de tasa de concepción en el día 25 post-parto y un 92,6%, 80% y 85,7% de tasa de supervivencia embrionaria en el día 62 para los grupos G1, G2 y G3 respectivamente. Los resultados sugieren que la aplicación intramuscular de plasma seminal inmediatamente después de la monta natural no determina un aumento estadísticamente significativo de la supervivencia embrionaria en comparación con la aplicación de GnRH o sólo con la monta natural (P ˂ 0,05).Ítem EFECTO DE LA GnRH SOBRE LAS CARACTERÍSTICAS SEMINALES Y TESTOSTERONA SÉRICA EN ALPACAS(Universidad Nacional del Altiplano - Puno, 2012-11) Pacheco Curie, Joel I.; Huanca Mamani, Teodosio; Santiani Acosta, Alexei; Evangelista Vargas, Shirley; Mamani Cato, Rubén Herberht; Quispe, T. L.En la estación experimental Quimsachata se realizó el siguiente trabajo de investigación, con los objetivos de evaluar el efecto de la administración de un análogo de GnRH sobre 9 características seminales y la concentración de testosterona sérica post aplicación. La colección de semen fue mediante vagina artificial donde se evaluó como características seminales el color, aspecto, pH, volumen, concentración, motilidad, vitalidad, anormalidades y endosmosis del semen entero una hora después de la aplicación de 50 ug de acetato de Buserelina, por tres oportunidades, con un intervalo de 7 días entre aplicación-colección, también se evaluó la concentración sérica de testosterona a los 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120 y 135 minutos post aplicación de la hormona exógena, se incrementó ligeramente el pH, la concentración, la endosmosis y el porcentaje de anormales, hubo una ligera disminución en el volumen, la vitaldiad y la mortalidad; la concentración de testosterona sérica se incrementa de manera creciente hasta llegar al pico a los 60 minutos, después de lo cual disminuye lentamente. Se comprobó que los incrementos no son sostenibles pues a partir de la cuarta aplicación de la hormona, disminuye la calidad espermática hasta hacerse azoospermicaÍtem Efecto de la GnRH sobre las características seminales y testosterona sérica en alpacas(Asociación Peruana de Reproducción Animal, 2013-07-31) Pacheco Curie, Joel I.; Huanca Mamani, Teodosio; Santiani Acosta, Alexei; Evangelista Vargas, Shirley; Mamani Cato, Rubén Herberht; Quispe, T. L.La descarga de GnRH del hipotálamo ocurre en forma intermitente en el día y la noche, esta descarga de GnRH produce la liberación de LH aproximadamente 30 minutos después, actuando sobre las células de Leydig, que inician la producción de progesterona, gran parte de la cual es transformada en testosterona, la cual tiene vida corta (20 a 60 minutos) y es de secreción pulsátil (Senger, 2003). La evaluación de los niveles séricos de testosterona en alpacas adultas a lo largo del año indica la existencia de diferencias estadísticas entre época reproductiva y no reproductiva como: 1142.50 ± 108.27, 992.50 ± 14.90, 877.50 ± 74.84 y 2445.00 ± 694.82 pg/mL en los meses de marzo, junio, septiembre y diciembre, respectivamente (Sumar et al., 1990). Dosis repetidas de 200 ng de GnRH en toros Holstein causaron un incremento en la producción seminal y las concentraciones de LH y Testosterona (Miller y Amman, 1986), mientras que dosis repetidas de 50 µg de GnRH en carneros produjeron un incremento en la concentración de testosterona sérica y un incremento de la actividad sexual (Schambancher y Lunstra, 1977). Uno de los factores que causan la baja fertilidad en las alpacas es la baja calidad seminal que presentan los machos, por lo cual se planteó esta investigación, con la intención de mejorar la calidad seminal mediante la utilización de GnRH exógena y evaluar el efecto de esta hormona sobre el perfil sérico de testosterona. Los objetivos del presente trabajo fueron determinar el efecto de la GnRH sobre las características seminales en alpacas machos y determinar las concentraciones séricas de testosterona post aplicación de GnRH.Ítem Efecto de la oxitocina sobre las características seminales y testosterona sérica en alpacas(Asociación Peruana de Reproducción Animal, 2012-07-31) Pacheco Curie, Joel I.; Huanca Mamani, Teodosio; Santiani Acosta, Alexei; Evangelista Vargas, Shirley; Mamani Cato, Rubén Herberht; Quispe, T. L.La oxitocina es una hormona que regula la contractibilidad del túbulo seminífero para facilitar el transporte de espermatozoides, además es un modulador de la esteroidogénesis (Nicholson, 1996); Oxitocina administrada en toros causa un incremento de la concentración espermática (Berndtson e Igboeli, 1988). Las características seminales fueron extensamente evaluados en alpacas, presentando alta variabilidad y mostrando valores diferentes a otras especies domesticas (Bravo, 2002). Los niveles séricos de testosterona en alpacas varían entre épocas, así tenemos: 1142.50 pg/mL en marzo y 877.50 ng/mL en septiembre (Sumar et al., 1990). El objetivo fue determinar el efecto de la oxitocina, sobre las características seminales en alpacas y la concentración sérica de testosterona post aplicación.Ítem Efecto de tres dilutores en la conservación del semen de alpacas(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2006-12-29) Raymundo T., Fernando; Huanca López, Wilfredo; Huanca Mamani, Teodosio; Huerta O., Sandra; Cordero Ramírez, AídaEl presente trabajo tuvo el propósito de evaluar la eficiencia de tres dilutores: Trisglucosa, Tris-fructosa y un dilutor comercial de cerdo, en la conservación del semen de alpaca. Se utilizaron 12 machos que fueron entrenados por un mes en la colección de semen con vagina artificial y frazadilla eléctrica. Los animales fueron de la Sub-Estación Experimental Quimsachata del INIA, Puno. El semen tuvo las siguientes características: volumen de 2.7 ± 0.8 ml, viscosidad de 1.04 ± 0.3, motilidad de 54.0 ± 8.0%, pH con tendencia a la alcalinidad, concentración de 248,100 espermatozoides/ml, y el color que predominó fue el blanco lechoso. El tiempo promedio de cópula fue de 26.5 ± 3.8minutos. Se utilizó un factor de dilución de 1 en 2 para semen y dilutor, respectivamente. Las diluciones fueron evaluadas considerando lamotilidad individual como único parámetro para determinar la viabilidad espermática. El dilutor Tris-glucosamostró una viabilidad promedio de 5.8 ± 1.1 horas, el Tris-fructosa de 6.1 ± 2.5 horas y el dilutor comercial de cerdo de 5.5 ± 1.0 horas, sin haber diferencia estadística significativa entre dilutores.Ítem Efecto de tres tratamientos sobre la filancia del semen y su relación con la calidad espermática en alpacas (Vicugna pacos)(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2021-12-22) Ramírez Rojas, Andrés Avelino; Palomino Guerrera, Walter; Contreras Huamani, Mijail; Olaguivel Flores, César AugustoEl estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto de la colagenasa, pipeteo e incubación para disminuir la filancia del semen y su relación con la calidad espermática en alpacas para su criopreservación. Las muestras de semen se obtuvieron por vagina artificial de machos de 4-7 años en el Laboratorio de Biotecnología Reproductiva de la Estación Experimental Agraria Canaán del INIA (Ayacucho, Perú). Se evaluó las características macroscópicas (volumen, pH y filancia) y microscópicas (motilidad, concentración y vitalidad) del semen. Cada muestra se distribuyó en tres alícuotas y diluida con dilutor comercial AndroMed® en proporción de 1:1 a 37 °C y distribuidas en tratamientos: T1=Colagenasa al 5%; T2=Pipeteo 10 veces y T3=Incubación a 37 °C durante 10 min. Las características microscópicas se evaluaron a los 0, 20, 40, 60 y 120 min pos-dilución. La filancia disminuyó significativamente de 0.95, 0.89 y 0.91 cm a 0.26, 0.27 y 0.33 cm a los 120 min pos-dilución para T1, T2 y T3, respectivamente (p<0.05), pero sin diferencias entre tratamientos. La motilidad espermática y la vitalidad no fueron afectadas por los tiempos pos-dilución, pero la motilidad disminuyó significativamente (p<0.05) luego de la dilución del semen. Se concluye que el uso de colagenasa, pipeteo e incubación disminuyeron la filancia del semen de alpaca pos-dilución, afectando la motilidad y vitalidad espermática.Ítem Efecto del plasma seminal sobre la respuesta a la prueba hipoosmótica en espermatozoides de alpaca (Vicugna pacos)(Universidad Nacional Micaela Bastidas de Apurímac (UNAMBA), 2014-10-24) Pacheco, J. I.; Mamani Cato, Rubén Hebert; Franco, F.; Zea, O.; Pezo, S. D.; Vélez, V. M.Se diseñó un estudio con el fin de evaluar el efecto del plasma seminal sobre la respuesta a la prueba hipoosmótica en espermatozoides de alpaca organizados para este fin de la siguiente manera: Grupo 1 (n = 15) espermatozoides libres de plasma seminal (aspirados obtenidos de los conductos deferentes en PBS), Grupo 2 (n = 15) espermatozoides libres de plasma seminal reconstituidos con plasma seminal (obtenidos de los conductos deferentes, aspirados en PBS, mezclado al 50/50% con plasma seminal) y Grupo 3 (n = 15) semen entero (obtenido por vagina artificial), las muestras se incubaron en una solución hipoosmótica ajustada a 100 mOsmol (citrato sódico + fructosa + 2H2O 100 mL) . Se mezclaron 0,1 mL + 0,9 mL de semen de la solución hipoosmótica, se incubaron durante 30 minutos en baño de agua a 37 °C y se detuvo la reacción con 0,1 mL de formaldehído al 4%. Se realizó el recuento de al menos 200 espermatozoides por muestra utilizando un objetivo de microscopio óptico de inmersión (100 X), la vitalidad se evaluó mediante tinción de eosina supravital (0,7%), nigrosina (1%). los resultados indican que no existe efecto perjudicial del plasma seminal sobre la respuesta endosmótica siendo, por el contrario, superior en el semen entero; la vitalidad de los espermatozoides sin plasma seminal es similar, sin embargo disminuye cuando se reconstituyen con plasma seminal, tal vez porque el plasma seminal es de otro animal; no existe correlación positiva entre endosmosis y vitalidad, lo que indica que esta última no refleja necesariamente la integridad de la membrana por lo que se recomienda realizar esta prueba rutinariamente en las pruebas de semen de alpaca.Ítem Embryo mortality and its relation with the phase of follicular development at mating in alpaca(Wageningen Academic Publishers, 2006-12-01) Huanca López, Wilfredo; Cervantes, Miriam; Huanca Mamani, TeodosioThe objective of this study was to evaluate the relation between the phase of follicular development (growth, maintenance or regression) during mating with embryo mortality to day 35-post mating. 116 alpacas ≥ 3 years of age were examined daily by transrectal ultrasonography (Aloka SSD 500) using a 7.5 MHz linear-array transducer to evaluate follicular status and then assigned to the following groups G1: Growing follicle 5 - 6 mm (n = 27); G2: Growing ≥ 7 mm.(n=30); G3 Maintenance ≥ 7 mm. (n = 30); G4 Regressing follicle ≥7 mm. (n= 29). Ultrasounds examinations were performed on days 0, 2, 9, 20, 25, 30 and 35 to determine occurance of ovulation (day 2); Corpus Luteum diameter (CL (day 9) and presence of embryonic vesicle or embryo (day 20 to 35). Male acceptance, ovulation and conception rate was compared by Chi Square test between groups. Acceptance rate was 100% in groups G2,G3 and G4 but only 81.5% of animals of G1 with follicle of 6 mm. accepted mating. Ovulation rate was 95.5; 96.7; 100.0 and 96.6% in G1; G2; G3 and G4, respectively (P > 0.05) and no differences were detected between groups in CL diameter. Conception rate on day 20 was 57.1; 68.9; 60.0 and 50.0% for G1; G2; G3 and G4 (P > 0.05). Embryonic loss rates from day 20 to 35 were not significantly different between groups. This result suggest that the status of follicular development at mating would not have influence on embryo mortality rate between day 20 and 35 of gestation in alpacas and that animals that accepted mating in all phase, including the one with follicle of 6 mm diameter present similar reproductive performance.Ítem Evaluación de dos dilutores comerciales en la congelación de semen con fines de inseminación artificial en alpacas (Vicugna pacos)(Universidad Nacional Micaela Bastidas de Apurímac (UNAMBA), 2014-10-24) Naveros Flores, Mary Luz; Contreras, MijaílLa presente investigación se desarrolló en el Instituto Nacional de Innovación Agraria INIA-Canaán-Ayacucho, en el Distrito de Andrés Avelino Cáceres, Provincia de Huamanga, y Departamento de Ayacucho, cuyo objetivo fue evaluar dos diluyentes comerciales en la congelación de semen con fines de inseminación artificial en Alpacas (Vicugna pacos). Se colectaron muestras eyaculadas por vagina artificial de cuatro reproductores en buen estado se obtuvieron 11 eyaculados para diluyente triladyl y 11 eyaculados para andromed, los cuales fueron evaluados micro y macroscópicamente. Los resultados obtenidos para las características macroscópicas fueron volumen del eyaculado (mL), obteniéndose un promedio de 1.06 ± 0.55 y 1.59 ± 0.44 mL para andromed y triladyl respectivamente; la filancia (cm) promedió 2.23 ± 1.13 y 2.55 ± 1.13 para triladyl y andromed respectivamente, sin diferencia significativa (P > 0.01), el color fue el blanco lechoso predominante. Se evaluaron las características microscópicas; motilidad (%), obteniéndose un promedio de 58,36 ± 8,86 y 15% CV y 62,73 ± 6,47 y 10% CV para andromed y triladyl respectivamente, sin diferencia significativa (P > 0,01); la motilidad post enfriamiento fue de 52,73 ± 6,84 y 51,82 ± 7,17 para andromed y triladyl respectivamente sin diferencia significativa (P > 0. 01), la motilidad posterior a la descongelación (%) fue de 26,18 ± 8,27 y 16,18 ± 3,34 de media para andromed y Triladyl respectivamente existiendo diferencia significativa (P < 0,01) y la concentración (x106) fue de 112,36 ± 19,09 y 110,18 ± 20,08 para andromed y triladyl respectivamente sin diferencia significativa (P > 0,01).Ítem Predictive characteristics of male fertility in alpacas with special reference to seminal NGF(Elsevier, 2023-12-29) Carrasco, R. A.; Bogle, O. A.; Ratto, M. H.; Ulloa Leal, C.; Mamani Cato, Rubén Herberht; Adams, Gregg PatrickRecent studies document the LH-releasing pathway of nerve growth factor (NGF) in male camelids and that the LH response to seminal NGF is associated with elevated plasma testosterone concentration. Results provide rationale for the hypothesis that NGF in semen is associated with male fertility. In Experiment 1, the association between the amount of NGF in the ejaculate and characteristics of the male reproductive system was examined in alpacas. The concentration of NGF was measured by radioimmunoassay in semen samples collected from male alpacas (n = 47) and correlated with sperm morphology and motility, and measurements of the male reproductive anatomy. Most ejaculates had NGF concentrations that, based on previous studies, triggered ovulation in female camelids, however, we only found a positive correlation between NGF concentration with sperm concentration, thread formation and total NGF, and a negative correlation with pH. In Experiment 2, a retrospective analysis was carried out to determine if breeding performance during the previous season was related to recent concentrations of seminal NGF in male alpacas (n = 22). Birth rates tended to be correlated with sperm concentration and total amount of NGF in the ejaculate (P = 0.09). Experiment 3 was a prospective study to determine the relationship between seminal NGF (n = 8 male alpacas) and ovulation and pregnancy rates in a breeding trial. No association was detected between seminal NGF concentration and ovulation rate, pregnancy rate, or LH response in the female. We conclude that among the breeding males used in our study, the abundance of seminal NGF was correlated with sperm concentration and thread formation, however, it was not predictive of male fertility in alpacas. Examination of males not previously selected as breeding stock may be expected to include a broader range of seminal NGF and provide a more comprehensive understanding of the relationship between seminal NGF and male fertility.Ítem Season and breed effect in fresh semen parameters at a bull semen production center in Peru(Unique Scientific Publishers, 2024-07-14) Dipaz Berrocal, Deysi; León Trinidad, Silvia Eliana; Figueroa Venegas, Deyanira Antonella; Mamani Chullo, Rolando; Ramirez Hernandez, Juan; Alvarez García, Wuesley Yusmein; Estrada Cañari, Richard; Quilcate Pairazaman, Carlos EnriqueIn the present study, the effect of breed, season, and their interaction on semen volume, sperm concentration, and motility was tested. Nine bulls were tested: three Braunvieh, three Simmental (B. taurus), and three Gyr (B. indicus). These bulls were managed equally in a cold semi-arid climate, divided into hot (from November to April) and cold (from May to October) for maximum and minimum temperature and relative humidity. Semen was collected twice a week for 24 consecutive months. MANOVA by ranks was used to determine significant effects; breed had a significant effect (P<0.001) on semen parameters, and seasonal variations were not significant (P>0.05). However, there was a significant effect (P<0.001) for the interaction between breed and season. To evaluate differences between breeds, we performed Tukey's post-hoc test; all pairwise comparisons (Braunvieh-Gyr, Braunvieh-Simmental and Gyr-Simmental) showed significant differences (P<0.001). Nonparametric one-way analysis showed significantly higher B. taurus breeds’ sperm concentration and B. indicus breed’s semen volume. For interaction between breed and season, Gyr reported higher sperm volume than B. taurus breeds in both seasons (P>0.05), but B. taurus breeds had higher sperm concentration in the cold season. The findings will help management make better decisions in semen collection, especially during peak season.Ítem Use of Androcoll-ETM to Separate Frozen-Thawed Llama Sperm From Seminal Plasma and Diluent(Universidad Austral de Chile, 2021-01-21) Guillén Palomino, Crissthel Yverlin; Fumuso, Fernanda Gabriela; Bertuzzi, Mariana Lucía; Giuliano, Susana María; Velásquez González, Nicolás; Bariani, María VictoriaIt is not easy to separate frozen-thawed South American camelid sperm from seminal plasma (SP) and diluents to be used for in vitro embryo production. The objective of this study was to evaluate Androcoll-E™ (AE) efficiency to separate llama sperm from SP and freezing extender in frozen-thawed semen. A total of 22 ejaculates from five Lama glama males were collected using electroejaculation. After performing semen analysis (sperm motility, concentration, viability, membrane function, and acrosome integrity), samples were cryopreserved with a diluent containing lactose, ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), egg yolk, and 7% dimethylformamide. After thawing, samples were divided in aliquots, one of which was used as a control and the others processed by AE. Experiment 1 (12 ejaculates): 100 μl of frozen-thawed semen was placed on top of 1,000 μl AE column and centrifuged at 800 g for 10 min. Experiment 2 (10 ejaculates): two samples of 100 μl of frozen-thawed semen were placed on two columns of 500 μl AE each, and both were centrifuged at 800 g for 10 and 20 min, respectively. Pellets were resuspended in Tyrode's albumin lactate pyruvate (TALP) medium, and sperm parameters were evaluated. A significant decrease in all sperm parameters was observed in thawed samples compared to raw semen. AE allowed the separation of frozen-thawed sperm from SP and freezing extender independently from the height of the column used and time of centrifugation assayed. Although no significant differences were found between AE columns, higher sperm recovery was observed with 500 μl of AE coupled with 20 min of centrifugation. Despite the significant decrease observed in sperm motility in AE samples, no changes in sperm viability, membrane function, and acrosome integrity were observed when comparing control thawed semen with the sperm recovered after AE (p > 0.05). The use of AE columns, either 500 or 1,000 μl, allows the separation of frozen-thawed llama sperm from SP and freezing extender, preserving the viability, membrane function, and acrosome integrity. Of the protocols studied, 800 g centrifugation during 20 min using a 500 μl column of AE would be the method of choice to process frozen-thawed llama semen destined for reproductive biotechnologies.