Examinando por Autor "Contreras Huamani, Mijail"

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Does the addition of follicular fluid in the in vitro maturation medium increase the oocyte maturation and embryo production in alpacas?
(Springer, 2023-06-07) Contreras Huamani, Mijail; Guillén Palomino, Crissthel Yverlin; Laines Arcce, Irving Mitchell; Silva Chaves, Maiana; Magalhães Melo, Luciana; De Figueirêdo Freitas, Vicente José
In alpacas (Vicugna pacos), the high cost of in vitro embryo production is also a consequence of the use of several substances in the culture medium. In addition, embryo production rates in this species are still considered low. Thus, in attempt to reduce the cost and to improve the in vitro embryo production rates, this study evaluates the effect of adding follicular fluid (FF) in the in vitro maturation medium on oocyte maturation and subsequent embryo production. After ovary collection at the local slaughterhouse, the oocytes were recovered, selected, and allocated in experimental groups: standard maturation medium (G1) and simplified medium added by 10% FF (G2). The FF was acquired from follicles between 7- and 12-mm diameter. The cumulus cell expansion and the embryo production rates were analyzed by chi-square with p < 0.05. No differences (p > 0.05) were observed in maturation rate between G1 (66.36%) and G2 (63.12%) groups. Likewise, no significant difference (p > 0.05) was verified between G1 and G2 for morula (40.85 vs 38.45%), blastocyst (7.01 vs 6.93%), and total number of embryos (47.87 vs 45.38%). In conclusion, it was possible to simplify the medium used for in vitro maturation of alpaca oocytes resulting in embryo production rates similar to the standard medium.
Efecto de la suplementación de dos agente capacitantes en medio de fecundación para la producción in vitro de embriones en Alpacas (Vicugna pacos)
(Asociación Peruana de Reproducción Animal, 2020-08-21) Palomino Guerrera, Walter; Contreras Huamani, Mijail; Olaguivel Flores, César Augusto
El presente estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto de la heparina y PHE (penicilamina, hipotaurina y epinefrina) en el medio de fecundación en la producción in vitro de embriones en alpacas. Los ovarios fueron transportados en solución salina fisiológica al 0.9% con gentamicina a 37°C durante 3 horas. Se utilizaron 227 ovarios, recuperándose 1132 ovocitos de calidad I, II y III; y madurados in vitro por 34h. Los ovocitos maduros se distribuyeron de forma aleatoria en cuatro tratamientos de medio de fecundación, las cuáles fueron suplementados con heparina al 2% y PHE según la siguiente distribución: T1=Control; T2=Heparina; T3=PHE; T4=PHE + heparina. Luego se añadió 1x106 espermatozoides/ml seleccionados por el método gradiente de Percoll (45/90%) e incubados por 18 h. Finalmente se cultivaron en medio de cultivo SOF durante 7 días. Los porcentajes de clivaje a las 24 h en cultivo fueron de 16.53, 19.92, 21.42 y 23.90% para los T1, T2, T3 y T4, respectivamente, habiendo diferencia estadística significativa del T1, T2 y T3 con respecto al T4 (P<0.05). Los porcentajes de mórulas al día 7 de cultivo fueron 24.23, 29.49, 35.00 y 35.30% para los T1, T2, T3 y T4, respectivamente, habiendo diferencia estadística del T1 y T2 con respecto al T3 y T4. Los porcentajes de blastocistos al día 7 de cultivo fueron 3.60, 3.25, 4.52y 6.34% para los T1, T2, T3 y T4, respectivamente, sin diferencia estadística entre tratamientos. En cuanto a calidad, los embriones (mórulas y blastocistos) producidos in vitro de los tratamientos con uso de agentes capacitantes PHE+ heparina y PHE destacaron (p≤0.05) con embriones de excelente calidad. En conclusión, el uso de la heparina y PHE + Heparina en medio de fecundación incrementa la producción in vitro de embriones de excelente calidad.
Efecto de tres tratamientos sobre la filancia del semen y su relación con la calidad espermática en alpacas (Vicugna pacos)
(Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2021-12-22) Ramírez Rojas, Andrés Avelino; Palomino Guerrera, Walter; Contreras Huamani, Mijail; Olaguivel Flores, César Augusto
El estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto de la colagenasa, pipeteo e incubación para disminuir la filancia del semen y su relación con la calidad espermática en alpacas para su criopreservación. Las muestras de semen se obtuvieron por vagina artificial de machos de 4-7 años en el Laboratorio de Biotecnología Reproductiva de la Estación Experimental Agraria Canaán del INIA (Ayacucho, Perú). Se evaluó las características macroscópicas (volumen, pH y filancia) y microscópicas (motilidad, concentración y vitalidad) del semen. Cada muestra se distribuyó en tres alícuotas y diluida con dilutor comercial AndroMed® en proporción de 1:1 a 37 °C y distribuidas en tratamientos: T1=Colagenasa al 5%; T2=Pipeteo 10 veces y T3=Incubación a 37 °C durante 10 min. Las características microscópicas se evaluaron a los 0, 20, 40, 60 y 120 min pos-dilución. La filancia disminuyó significativamente de 0.95, 0.89 y 0.91 cm a 0.26, 0.27 y 0.33 cm a los 120 min pos-dilución para T1, T2 y T3, respectivamente (p<0.05), pero sin diferencias entre tratamientos. La motilidad espermática y la vitalidad no fueron afectadas por los tiempos pos-dilución, pero la motilidad disminuyó significativamente (p<0.05) luego de la dilución del semen. Se concluye que el uso de colagenasa, pipeteo e incubación disminuyeron la filancia del semen de alpaca pos-dilución, afectando la motilidad y vitalidad espermática.
Efecto del uso de dos técnicas de selección espermática en la producción in vitro de embriones de alpaca
(Asociación Peruana de Reproducción Animal, 2021-08-13) Contreras Huamani, Mijail; Naveros Flores, Mary Luz; Olaguivel Flores, César Augusto
El objetivo del presente trabajo de investigación fue evaluar el efecto del uso de dos técnicas de selección espermática en la producción in vitro de embriones de alpaca. Los ovarios y testículo fueron colectados del matadero local, y trasladados a 37°C en solución salina (0.9%) suplementado con gentamicina. Los ovocitos de calidad I, II y II fueron incubados en medio de maduración por 32 h a 38.5 °C y 5% O2 y 5% CO2. Para la fecundación in vitro, los espermatozoides del epidídimo fueron seleccionados mediante la técnica de gradiente de Percoll y Swim up. 18h después de incubados los ovocitos con los espermatozoides, estos fueron denudados de las células del cumulus y cultivados en medio de cultivo SOFaa durante 7 días. Se evalúa la tasa de mórulas y blastocistos y su calidad morfológica al día 7 de cultivo. De un total de 370 ovarios se recuperaron 1137 ovocitos, haciendo un promedio de 3,6 ovocitos/ovario. Luego del proceso de maduración y fecundación y cultivo de in vitro, la tasa de blastocistos fue de 8,43 ± 6,04% y 3,89 ± 1,75%, para ovocitos fecundados con espermatozoides seleccionados con gradiente de Percoll y Swim up, respectivamente, no encontrándose diferencias estadísticas significativas (p>0.05), entre los grupos. En conclusión, la fecundación in vitro de ovocitos de alpaca con espermatozoides seleccionadas con dos técnicas de selección (percoll y swim up) no influyen significativamente en la cantidad y calidad de mórulas y blastocistos al día 7 de cultivo embrionario.