a SPRA SPERMOVA Asociación Peruana de Reproducción Animal Spermova 2012; 40 - 41 Artículo original: EFECTO DE LA HORA DE SIEMBRA, EDAD Y NÚMERO DE CÚERPOS LUTEOS EN RECEPTORAS DE EMBRIONES CRIOPRESERVADOS DE OVINO DE LA RAZA DOHNE MERINO Effect of time of seeding, age and number of corpora lutea in cryopreserved embryos receiving of sheep breed dohne merino Gonzáles, M.L.(*); INTRODUCCIÓN O. Cardenas; R. Sapana La transferencia de embriones en ovinos permite introducir nuevas razas mediante la Programa Nacional Innovación en Camélidos – implementación de núcleos genéticos élite para reconformar la ganadería, mejorar la Ovinos - INIA - Puno – Perú. rentabilidad y su competitividad. Willadsen et al. (1976) lograron los primeros corderos a partir de embriones congelados. La transferencia de embriones descongelados implica la adaptación * E-mail: mariolino23@hotmail.com de la cría al medio ambiente de la receptora, en parte, debido al aporte de anticuerpos maternos durante la gestación y lactancia (Mc Ginnis et al., 1993); independientemente de la técnica de sincronización utilizada, esta debe ser eficiente y confiable (Rangel, 1997) para lograr una tasa mayor de preñez en receptoras en condiciones de sierra. El objetivo del estudio fue determinar Palabras Clave: el efecto de la hora de siembra embrionaria, la edad y el número de cuerpos lúteos en la fertilidad Receptora, embriones, ovino, Dohne Merino de la borrega receptora de embriones criopreservados de la raza Donhe Merino. MATERIALES Y MÉTODOS para proceder a hacer la transferencia quirúrgica denominada laparatomía, con una incisión de 4 cm en la línea media El presente estudio se realizó en la Estación Experimental abdominal, luego se procedió a ubicar los órganos reproductivos, Agraria Illpa, del Instituto Nacional de Innovación Agraria (INIA), para evaluar el cuerpo lúteo del ovario y realizar una punción en la en el Centro de Investigación y Producción Illpa ubicado a 3,820 cara dorsal del cuerno uterino, en su tercio superior. Mediante la m.s.n.m., en el departamento y provincia de Puno, distrito de micropipeta se depositó un embrión por hembra receptora Paucarcolla, zona agroecológica Suni. En el estudio se utilizaron 32 (mórulas compactas y blastocistos tempranos de 6 y 6.5 días) en borregas de la raza Corriedale, de diferentes edades en condición la luz uterina (ipsilateral respecto al cuerpo lúteo). El diagnóstico corporal 3. Las hembras fueron sincronizadas celo a través de un de preñez se realizó a los 28 días con ecógrafo de marca Siui y protocolo usando esponjas intravaginales impregnadas con 20 mg de transductor de 5.0 MHz. En el estudio se usó la Prueba de chi Acetato de Flugesterona (Chronogest, Intervet Internacional B.V. cuadrado con y sin corrección de Yates. Holanda) durante 12 días y una aplicación vía intramuscular profunda de 500 UI Gonadotropina Coriónica Equina (eCG) (Folligon, RESULTADOS Y DISCUSIÓN Intervet internacional B.V. Holanda) al final del tratamiento progestacional. Se transfirieron 32 embriones de la raza Dohne En la Tabla 1, se presentan los resultados de tasa de fertilidad Merino procedentes de Australia, durante los días 21 de julio, 1 y 13 en borregas receptoras de 4 dientes y borregas boca llena. El de agosto del 2011. La transferencia embrionaria se realizó en dos análisis de diferencia de proporciones no evidenció diferencias grupos de tiempo: de 192 a 196 horas y de 197 a 201 horas post-retiro estadísticamente significativas en la tasa de fertilidad luego de la de las esponjas en las 3 fechas. El protocolo para el descongelamiento transferencia embrionaria en borregas receptoras de distinta de los embriones, consistió en retirar la pajuela del tanque de nitrógeno, exponer a 5 segundos a temperatura ambiente (15 a 20ºC), edades (P≥0.05). sumergir a la pajuela en el baño maría a 37ºC por 10 segundos y secar La tasa de fertilidad promedio usando la técnica transferencia la pajuela con papel secante. Se cortó la pajuela en el extremo del de 32 embriones criopreservados a borregas (1 embrión/hembra tapón de algodón y del sello, para vaciar lentamente el contenido de la receptora) fue del 41% (13/32), dos de ellas presentaron pérdida pajuela en una placa pequeña con medio de rehidratación Holding embrionaria en el primer mes de gestación. Estos resultados son (SYNGRO Holding, Bioniche, USA) y luego lavar en placa de seis superiores a los obtenidos por Folch et al. (2000), en el cual las pocillos. Una vez que el embrión se fue equilibrado y calificado por receptoras de embriones criopreservados fueron tratadas con su calidad post descongelamiento, se cargó a un catéter “Tom Cat” FGA y eCG, con una tasa de fertilidad de 32.0 y 36.0 % en los aspirando medio de mantenimiento, aire, medio de mantenimiento años 1998 y 1999, respectivamente. con el embrión, aire y finalmente medio de mantenimiento 40 Gonzáles, M.L.; O. Cardenas; R. Sapana. Spermova 2012; 2(1): 40-41 Tabla 1. Tasa de fertilidad por edad en borregas receptoras de En coincidencia con nuestras observaciones, se debe tener embriones de la raza Dohne Merino. presente que la sobrevivencia embrionaria está influenciada por el número de cuerpos lúteos de la receptora al momento de Edad Preñada Vacia transferir el o los embriones. Armstrong y Evans (1983) n 2 5 2 Dientes % 28.6 71.4 obtuvieron valores del 52, 63 y 75% de sobrevivencia n 4 4 4 Dientes embrionaria con recipientes con 1, 2 y 3 cuerpos lúteos. % 50.0 50.0 n 3 6 6 Dientes % 33.3 66.7 n 4 4 CONCLUSIONES Boca llena % 50.0 50.0 n 13 19 Total general % 40.6 59.4 Los porcentajes favorables de sobrevivencia de embriones (P≥ 0.05), prueba de chi cuadrado, tres grados de libertad, α = 0.05 criopreservados del presente trabajo y el conocer el efecto de la hora de siembra embrionaria y el número de cuerpos lúteos de la En la Tabla 2, se presenta la tasa de fertilidad en borregas borrega receptora de embrión sobre su fertilidad, permite un receptoras de embriones de la raza Dohne Merino según momento futuro promisorio para la innovación de la crianza de ovinos en el de siembra embrionaria post retiro de la esponja intravaginal. Se país. observó un mayor porcentaje de fertilidad en las borregas a las que se les realizó la transferencia de embriones entre las 197-201 vs 192-196 BIBLIOGRAFÍA horas post retiro de esponja. Ÿ Armstrong, D.T.; G. Evans. 1983. Factors influencing success Tabla 2. Tasa de fertilidad en borregas receptoras de embriones de la of embryo transfer in sheep and goats. Theriogenology, 19: 31- raza Dohne Merino por hora de transferencia de embriones post 42. retiro de la esponja intravaginal. Ÿ Folch, J.; J. Olivera; B. Aguilar; J.L. Alabart; P. Sanchez; E. Echegoyen; M.J. Cocero. 2000. Resultados obtenidos en la Hora Preñada Vacia transferencia de embriones dentro del programa genetico de la N 10 12 197-201 u.p.r.a. carnes oviaragon.Zaragoza – España. % 45.5 54.6 N 3 7 Ÿ Mc Ginnis, L.K.; S.C. Duplantis Jr.; C.R. Youngs. 1993. 192-196 % 30.0 70.0 Cryopreservation of sheep embryos using ethylene glycol, Anim. Repr. Sci. 30: 273-280. En la Tabla 3, se presenta la tasa de fertilidad según el número de Ÿ Rangel, S.R.; T.J. Echegaray; S.C. Apodaca; O.J. Ayala. 1997. cuerpos lúteos presentes en la superficie del ovario de las receptoras Efecto de la administración de PMSG en ovejas pelibuy al momento de la transferencia de embriones. Se observó un sincronizadas. X Reunión de la asociación mexicana de técnicos incremento de la fertilidad en borregas que presentaron 2 o más especialistas en ovinos. Mexico. cuerpos lúteos en comparación con aquéllas que presentaron 1 Ÿ Willadsen, S.M.; C. Polge; L.E.A. Rowson; R.M. Moor. 1976. ≥ Deepfreezing of sheepembryos. J. Repr. Fertil. 46: 151-154 cuerpo lúteo (P 0.05). Tabla 3. Fertilidad en borregas receptoras de embriones de la raza Dohne Merino de acuerdo a número de cuerpo lúteo al momento de la transferencia de embriones Número de Preñada Vacía Total cuerpo lúteo n 4 10 14 1 % 28.6 71.4 100.0 n 9 9 18 2 a más % 50.0 50.0 100.0 Transferencia de embrión en tercio superior del cuerno uterino Cuerpo lúteo en Ovario Izquierdo, previo a la transferencia embrionaria 35 Corderos nacidos de transferencia de embriones, raza Dohne Merino 41